DNA测序

1. 测序项目及收费标准：

2. 特色服务：
（1）本实验室应用ABI公司310型DNA测序仪进行样品的序列鉴定。测序者可以观看测序全过程。
（2）DNA测序的过程及步骤如下：待测样品PCR产物（包括样品的1.5％琼脂糖电泳图）→我室对PCR产物纯化（或切胶纯化）→测序PCR扩增待测样本→测序PCR产物纯化（二次纯化）→纯化产物上机测序。（备注：整个过程需要10小时的工作时间，且全程开放观看。能让您更直观了解DNA的测序过程。)。
（3）正常情况下PCR产物和切胶纯化PCR产物每个反应 / 每样本一次测序长度430bp, 质粒克隆测序长度600bp。
（4）在我实验室测序的样本，我们提供chromas2.23软件一个，该软件可以直接进入NCBI数据库进行相关数据的分析。

3.测序样本注意事项。
（1） 测序PCR扩增待测样本需要您提供：PCR扩增引物浓度3.2pmol/μl（或3.2umol/L）,体积10μl /样本，提供引物全序列、PCR退火温度、Tm值、GC含量和3－5μl测序样品的1.5％琼脂糖电泳图。备注：随机引物（RAPD、AFLP引物）、简并引物、引物长度不足15bp的扩增产物不能用于测序。
（2） 未纯化PCR产物请提供25μl PCR产物，待测产物片段应大于130bp，浓度大于200ng/μl。
（3）需要切胶纯化PCR产物请提供50μl PCR产物，待测产物片段应大于130bp，浓度大于200ng/μl。
（4）已自行纯化PCR产物请提供15μl 溶解于蒸馏水PCR产物（请勿溶解于TE），待测产物片段应大于130bp，浓度大于200ng/μl。
（5）如需质粒克隆测序的样本，我室提供通用引物：M13＋、M13—; 抗生素：Amp; 质粒puc18、BLU；细菌：大肠杆菌。
（6）如已自行克隆纯化的质粒，质粒溶于20－40μl蒸馏水中（请勿溶解于TE），浓度大于200ng/μl。『备注：质粒提取建议用试剂盒提取，同时提供1ml含相应质粒的菌液备用，需要注明载体和插入目的片段的长度；如不是使用通用引物：M13＋、M13—的样本，请提供您的通用引物。