9月8日至9日,贵州医科大学分子生物学重点实验室仪器设备科在云漫湖校区实验室分别开展BD Verse流式细胞仪和安捷伦生物(ACEA)NovoCyte系列流式细胞仪理论和操作培训。本次培训共有70余名新进研究生、管理教师和技术操作人员参加,涉及多个专业和方向。两台流式细胞仪的培训采用“理论讲解+上机实操”方式,分仪器、分时段进行。
9月8日10:00,BD流式细胞仪培训率先开展。我室肖雁老师先介绍了仪器基本结构、开机流程、质控要求、上样操作、数据采集和关机维护等内容,随后对参训人员进行实操实验指导。参训人员学习了仪器初始化、性能质控、荧光通道设置、补偿调节、样品上样和细胞群设门等操作。针对上样速度、电压调节、荧光溢出补偿和细胞碎片排除等常见问题,肖雁老师逐一示范并纠正。
9月9日13:00—14:00,安捷伦流式细胞仪理论培训在E1-312进行。安捷伦流式细胞仪技术工程师冷良围绕仪器原理、软件操作、实验设计、荧光补偿、设门策略和数据分析等内容进行讲解。理论环节中,冷良老师结合实验案例,对样品制备、染色方案、对照设置和结果判读进行了细致讲解。例如,细胞凋亡检测常用Annexin V/PI双染,通过不同荧光通道区分活细胞、早期凋亡细胞和晚期凋亡/坏死细胞;细胞周期检测常用PI染色,结合RNase处理,分析G0/G1期、S期和G2/M期比例;线粒体ROS检测可使用DCFH-DA等探针,通过荧光强度变化反映细胞内氧化应激水平;细胞膜电位变化检测常用JC-1染色,以红绿荧光比值判断膜电位状态;免疫因子和T细胞因子检测则涉及多色荧光抗体标记、补偿调节和设门分析,用于评估免疫细胞亚群及细胞因子表达情况。
14:00—15:00,实验上机操作在3-50进行实操练习。冷良老师现场指导参训人员完成开机、质控、样品上样、采集参数调整、数据保存和结果分析等操作,并解答了多色荧光标记和补偿调节中遇到的问题。本次培训内容主要涉及细胞凋亡检测、细胞周期检测、线粒体ROS检测、细胞膜电位变化、免疫因子检测和T细胞因子检测等实验操作。
此次培训旨在帮助新进研究生、管理教师和技术操作人员熟悉BD Verse和安捷伦NovoCyte系列流式细胞仪的性能与操作规范,提高实验操作能力和数据分析能力,为分子生物学相关研究提供技术支撑。下一步,贵州医科大学分子生物学重点实验室仪器设备科将继续结合科研需求,开展仪器培训与交流活动,完善仪器管理和共享服务,提升实验室科研保障水平。
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